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【摘要】 目的 將小動物行為學分析系統(tǒng)用于大鼠曠場實驗，并對測定指標與傳統(tǒng)的評判標準進行相關(guān)性分析， 建立曠場實驗中各指標的平均值及 95% 置信區(qū) 間。通過對曠場實驗大鼠進行篩選，減少個體差異對結(jié)果造成的影響。方法 用小動物行為學分析系統(tǒng)測定分析 3 min 內(nèi)曠場分析箱中大鼠運動距離和中央?yún)^(qū)域運動距離，同時記錄大鼠穿 格數(shù)與中央?yún)^(qū)域停留時間。結(jié)果 穿格數(shù)與運動距離相關(guān)性良好( r = 0. 959，P < 0. 01) ，中央?yún)^(qū)域停留時間與中央?yún)^(qū)域運動距離相關(guān)性良好( r = 0. 915，P < 0. 01) ，建立了各測定指標參考值。結(jié) 論 可以用測定運動距離和中央?yún)^(qū)域運動距離代替?zhèn)鹘y(tǒng)的穿格數(shù)和中央?yún)^(qū)域穿格數(shù)。
【關(guān)鍵詞】 小動物行為學分析系統(tǒng);曠場實驗;相關(guān)性分析;參考值
實驗動物的整體自主行為學分析研究在毒理學、精神藥理學、評估藥物和環(huán)境對動物行為的改變及對神經(jīng)系統(tǒng)的作用等領(lǐng)域中廣泛應用。隨著現(xiàn)代計算機技術(shù)與圖像分析技術(shù)的發(fā)展，以此類技術(shù)為基礎(chǔ) 的動物自動行為學數(shù)據(jù)采集分析成為發(fā)展的趨勢， 但這些新技術(shù)下測定指標與原有的是否一致，新的指標與傳統(tǒng)測定指標間的相關(guān)性如何鮮見報道。現(xiàn)進行 大鼠的曠場實驗，對曠場實驗傳統(tǒng)指標與小動物行為記錄分析系統(tǒng)指標進行相關(guān)性分析以確立之間的關(guān)系并建立其參考值范圍。
材料與方法
1. 1 動物 Wistar 大鼠，雄性，SPF 級，體 質(zhì) 量 180 ～ 220 g，南 方 醫(yī) 科 大 學 實 驗 動 物 中 心 提 供，合 格 證 號: SCXK(粵)20060015。
1. 2 儀器 小動物行為記錄分析系統(tǒng) ;曠場分析箱木板 100 × 100 × 40 cm(長× 寬 × 高)，箱底均分為 25 個方格(20 × 20 cm)，內(nèi)部墻壁涂黑，沿墻格稱為外周區(qū)域，其余為中央?yún)^(qū)域。
1. 3 測定條件 行為學實驗室保持安靜通風，室內(nèi)暗光，手術(shù)燈照天花板反射到實驗操作區(qū);實驗人員遠離曠場分析箱(以操作角度看不到箱中實驗動物為準)。實驗前，動物在測定房間中適應 10 min 以上。
1. 4 測定方法 小動物行為學分析系統(tǒng)中將曠場分析箱從左上開始，按左到右順序以不同顏色編號為相同的 25 個小格，其中 7、8、9、12、13、14、17、18 和 19 為中央?yún)^(qū)域，其余為外周格，13號格為正中格。每次實驗時捏住大鼠尾巴距根部 2 /3 處輕放入 13 號格中，顯示器中觀察其 3 min 內(nèi) 活 動 情 況，每次測定結(jié)束將動物排泄物清除干凈，每只僅測定 1 次。實驗時間結(jié)束 錄像分析，軟件統(tǒng)計。
1. 5
統(tǒng)計學方法 用 SPSS13. 0 統(tǒng)計軟件對各項指標數(shù)據(jù)進行正態(tài)分布檢驗，符合正態(tài)分布者用 x珋± 1. 96 s 計算正常參考值范圍，不 符合者，用百分位數(shù)法求P 2. 5 ～ P 97. 5 分布范圍。相關(guān)分析的雙變量符合正態(tài)分布者采 用 Pearson 相 關(guān) 分 析，不服從正態(tài)分布用Spearman相關(guān)分析。
2 結(jié)果
2. 1 測定指標的平均值
3 討論
曠場實驗是將一定面積劃分為不同區(qū)域，并以相應的格子對應。大鼠在新環(huán)境中是由緊張、興奮、探索 再到適應的一系列過程，興奮性的老鼠在適應的環(huán)境中表現(xiàn)為行動活躍，四處走動，留下自身的生物氣息，跨格次數(shù)的多少反應其興奮程度。跨格次數(shù)的多少與動物的行動量成正比，跨格次數(shù)多，活動距離也應增加，但由于局限于當下實驗條件，以往只能用跨格次數(shù)從側(cè)面反映行動的長短。從 3 個批次實驗結(jié)果可知，礦場實驗中動物總運動距離和總穿格數(shù)、央?yún)^(qū)域運動距離與中央?yún)^(qū)域停留時間都具有良好相關(guān)性，重復性好，也證明了他們間的對應關(guān)系。現(xiàn)在以大鼠總運動距離等新指標應能更直接地反應動物的興奮程度，從而避免了傳統(tǒng)的人為觀察、手工記錄，所造成標準不一致性、主觀性程度大、費時費力等缺點，也很好的解決了觀察人的行為對實驗動物的“二次應激”的不足，取得更加真實準確的實驗數(shù)據(jù)。
